Jednokrokové qPCR mastermixy

Jednokrokové RT-qPCR kity qMAXSen™ (Canvax)

Jednokrokový RT-qPCR kit spojí reverzní transkripci a kvantitativní PCR v jedné reakci – RNA se přepíše na cDNA a hned amplifikuje a detekuje. V nabídce jsou kity Canvax qMAXSen™ One-Step Green (interkalační barvivo) a One-Step Probe (sondy), ve verzích High ROX a Low ROX.

Přehled

Jak vybrat

• Detekce RNA virů a exprese – jednokrokový kit šetří čas a snižuje riziko kontaminace.
• Green nebo Probe – sondy pro vyšší specificitu a multiplex, Green pro univerzální použití.
• ROX – podle cykléru: High ROX pro starší přístroje ABI (např. 7000, 7300, 7900, StepOne), Low ROX pro ABI 7500, ViiA 7, QuantStudio, přístroje bez ROX (např. Bio-Rad, Roche) verzi bez ROX nebo podle návodu výrobce cykléru.
• Balení – počet reakcí v balení ověřte u produktu.

Na co si dát pozor

• S RNA pracujte v prostředí bez RNáz (rukavice, špičky s filtrem, RNase-free voda) a vzorky držte na ledu.
• Ověřte vhodnou verzi ROX pro váš cyklér v jeho dokumentaci – nesprávná volba zhorší normalizaci signálu.

Časté dotazy – Jednokrokové qPCR mastermixy

Jaký je rozdíl mezi jednokrokovým a dvoukrokovým postupem?

Jednokrokový provádí RT i qPCR v jedné zkumavce; dvoukrokový nejprve připraví cDNA, kterou můžete použít opakovaně.

Co znamená ROX?

Pasivní referenční barvivo pro normalizaci signálu; potřebná koncentrace závisí na cykléru.

Potřebuji reverzní transkriptázu zvlášť?

Ne, jednokrokový kit obsahuje reverzní transkriptázu i polymerázu.

Jaký je rozdíl mezi Green a Probe?

Green používá interkalační barvivo, Probe je určen pro fluorescenční sondy.

Kdo je vyrábí?

Canvax.