Centrifugy

Laboratorní centrifugy – jak vybrat správný model

Centrifuga odděluje složky vzorku odstředivou silou – krevní buňky od plazmy, buňky od média nebo sraženinu od supernatantu. V Aloquence najdete mini centrifugy na rychlé stočení mikrozkumavek, mikrocentrifugy pro molekulární biologii, klinické a univerzální stolní centrifugy i chlazené modely s objemem až 4 × 1 000 ml. V tomto přehledu zjistíte, podle čeho vybrat typ centrifugy, rotor a příslušenství.

Co najdete v kategorii Centrifugy

Jak vybrat centrifugu: začněte od vzorku

Nejprve si ujasněte, jaké zkumavky budete centrifugovat a kolik jich potřebujete zpracovat najednou. Jiná centrifuga se hodí na 24 mikrozkumavek 1,5/2 ml při izolaci DNA, jiná na odběrové zkumavky krve a jiná na kónické zkumavky 50 ml nebo lahve o objemu stovek mililitrů.

• Mikrozkumavky 0,2–2 ml – mikrocentrifuga s úhlovým rotorem, například modely s 15 000 ot./min a rotorem 24 × 1,5/2 ml.
• Odběrové zkumavky krve – klinická centrifuga s výkyvným nebo hybridním rotorem a nosiči pro zkumavky typu Vacutainer.
• Zkumavky 15 a 50 ml, lahve – univerzální stolní centrifuga s výměnnými rotory, například s kapacitou 4 × 175 ml nebo více.
• Kapiláry na hematokrit – hematokritová centrifuga se speciálním rotorem na 24 kapilár.
• Mikrotitrační destičky – centrifuga s výkyvným rotorem pro destičky nebo malá centrifuga na destičky.

Otáčky, nebo g? Parametry, které je třeba sledovat

Protokoly většinou uvádějí relativní odstředivou sílu (RCF, × g), nikoli otáčky. Stejné otáčky dávají při různém poloměru rotoru různou sílu. Přepočet: RCF = 1,118 × 10⁻⁵ × r (cm) × (ot./min)². Při porovnávání modelů proto sledujte hlavně maximální RCF pro konkrétní rotor.

• Maximální otáčky a RCF – např. mini centrifuga do ~2 000–8 000 × g, mikrocentrifuga kolem 21 000 × g.
• Kapacita a typ rotoru – úhlový rotor separuje rychleji, výkyvný vytváří rovný sediment a je vhodný pro krev a gradienty.
• Chlazení – rozsah teplot (např. −10 až +40 °C nebo −20 až +40 °C) a funkce předchlazení.
• Bezpečnost – automatické rozpoznání rotoru, kontrola nevyvážení, zámek víka, aerosolově těsná víka při práci s infekčním materiálem.
• Programy a ovládání – paměť programů, časovač, nastavení zrychlení a brzdění.
• Hlučnost a rozměry – důležité při umístění na pracovní stůl vedle dalších přístrojů.

Nechlazená, chlazená, nebo mini centrifuga?

Nechlazená (ventilovaná) centrifuga postačí pro většinu rutinních postupů – oddělení séra, sedimentaci buněk, izolaci DNA pomocí kolonek. Například NEYA 16 HIGH SPEED dosahuje 16 000 ot./min, má kapacitu 4 × 175 ml, 10 programů a automatické rozpoznání rotoru.

Chlazená centrifuga je potřeba, když se vzorek nesmí zahřát – při práci s proteiny, RNA, živými buňkami nebo při delších cyklech s vysokými otáčkami. Model NEYA 16R HIGH SPEED má nastavitelnou teplotu od −10 °C do +40 °C a funkci předchlazení. Pro velké objemy jsou určeny chlazené centrifugy OHAUS Frontier 5000 Multi-Pro s kapacitou až 4 × 1 000 ml.

Mini centrifuga slouží k rychlému stočení kapek ze stěn a víček zkumavek před dalším krokem. Například MULTISPIN 12 dosahuje 12 000 ot./min (7 900 × g) a dodává se s rotorem pro mikrozkumavky i PCR stripy. Pokud potřebujete vzorek zároveň promíchat, zvolte kombinaci centrifuga–vortex.

Rotory a příslušenství: na co si dát pozor

• Kompatibilita – rotory a nosiče jsou vázané na konkrétní typ centrifugy. U rotorů OHAUS je u každého uvedeno, se kterými modely Frontier 5000 jsou kompatibilní.
• Typ dna zkumavky – nosiče a redukce se liší pro zkumavky s kulatým dnem, kónické zkumavky typu Falcon a odběrové zkumavky.
• Vyvážení – zkumavky ukládejte vždy symetricky se stejnou hmotností; nevyvážení zkracuje životnost ložisek a může zastavit cyklus.
• Biologická bezpečnost – při práci s infekčním materiálem používejte uzavíratelná (aerosolově těsná) víka a nosiče.
• Max. RCF zkumavky – každá zkumavka má povolenou maximální odstředivou sílu; vyšší síla ji může prasknout.

Pro klinické laboratoře je praktická sada BLOOD KIT s nosiči pro odběrové zkumavky, pro velké objemy například výkyvný rotor 4 × 1 000 ml s aerosolově těsnou konstrukcí.

Časté dotazy – Centrifugy

Jaký je rozdíl mezi otáčkami (ot./min) a RCF (× g)?

Otáčky udávají, kolikrát se rotor otočí za minutu. RCF je skutečná odstředivá síla působící na vzorek a závisí i na poloměru rotoru. Protokoly proto obvykle uvádějí × g – při výměně rotoru je třeba otáčky přepočítat.

Kdy potřebuji chlazenou centrifugu?

Když pracujete se vzorky citlivými na teplotu (RNA, proteiny, enzymy, živé buňky) nebo spouštíte dlouhé cykly při vysokých otáčkách, při kterých se komora zahřívá. Na běžné oddělení séra nebo stočení kolonek postačí nechlazený model.

Úhlový, nebo výkyvný rotor?

Úhlový rotor dosahuje vyšší RCF a separuje rychleji, proto je typický pro mikrocentrifugy a peletování. Výkyvný rotor se během chodu sklopí do vodorovné polohy a vytváří rovný sediment – hodí se na krev, gradienty a destičky.

Co znamená automatické rozpoznání rotoru?

Centrifuga sama zjistí, který rotor je nasazen, a nedovolí nastavit vyšší otáčky, než rotor snese. Je to důležitá bezpečnostní funkce u přístrojů s více výměnnými rotory.

Musím centrifugu vždy vyvážit?

Ano. Zkumavky se stejnou hmotností ukládejte proti sobě; pokud máte lichý počet vzorků, doplňte vyvažovací zkumavku s vodou. Nevyvážení zvyšuje vibrace, opotřebení a může způsobit zastavení cyklu.

Hodí se mini centrifuga k izolaci DNA kolonkami?

Většinou ne – kolonkové protokoly obvykle uvádějí kolem 11 000 × g, zatímco mini centrifugy dosahují řádově 2 000–8 000 × g. Vždy si ověřte hodnotu v návodu ke kitu. Mini centrifuga slouží k rychlému stočení kapek; pro kolonky zvolte mikrocentrifugu z kategorie nechlazených nebo chlazených centrifug.